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[题]血细胞比容的离心沉淀测定有哪些方法?其原理如何?其优缺点如何?分享

6727 22 0 2019年11月14日

HCT血细胞比容定义

血细胞比容(HCT)旧称血细胞压积(PCV)
是指一定体积的全血(毛细血管或静脉血)中红细胞所占容积的相对比例。
HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关,主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。

HCT测定原理

HCT直接测定用离心法,间接测定用血液分析仪法。

1.离心沉淀法
常用微量血细胞比容法和温氏( Wintrobe)法
其检测原理基本相同:以不改变红细胞体积及血容量的抗凝剂处理全血,注入标准毛细玻璃管或Wintrobe管,用一定转速离心一定时间后,读取红细胞层的高度。血液离心后分5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层

温氏法操作
取EDTA-K2或肝素钠抗凝静脉血2ml,加入温氏管中,用水平离心机以2264g (即有效半径22. 5cm, 3000r/min), 离心30分钟,离心后血液分为5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层(紫黑红色)、带氧红细胞层(鲜红色)。读取还原红细胞层柱高的毫米数,乘以0.01,即为每升血液中红细胞体积的升数。

微量法操作:
取抗凝全血或末梢血,充人一次性毛细玻管(管长75mm,内径0.8-1.0mm,壁厚0.20~0.25mm,每支含肝素2U)的2/3 (50mm)处,封口后,用水平式毛细管Hct离心机以12 000r/min (相对离心力RCF≥10 000g),离心5分钟,用专用读数板或刻度尺,读取还原红细胞层和全层长度,计算HCT值。

2.血液分析仪法
由测定红细胞计数和红细胞平均体积后导出,HCT=RBCXMCV

HCT参考值

男性:0.380~0.508;
女性:0.335~0.450;
--本科教材

Wintrobe法:男性0.40~0.54;女性0.37~0.47
微量法:男性0.47士0.04;女性0. 42士0.05
---指导书

HCT检测方法学评价

方法
优点 缺点

温氏法(离心法)

应用广泛,无须特殊仪器

难以完全排除残留血浆(可达2%~-3%),单独采血用血量大。已渐被微量法取代

微量法(离心法)

WHO推荐为常规方法,NCCLS(H7-A3)推荐为参考标准。标本用量少,相对离心力高,结果准确、快速、重复性好
需微量高速血液离心机

微量离心计算法

ICSH (2003 年)推荐的测定HCT的替代参考方法,可常规用于HCT测定的校准。

计算公式:  HCT=  Hb/离心HCT值- 0.0119)/0.9736

需用参考方法测定全血Hb和压积红细胞Hb浓度。HCT= 全血Hb/压积红细胞Hb


血液分析仪法

无须单独采血测定,检查快速,精密度高

准确性不及微量离心法,需定期校正仪器

放射性核素法

ICSH曾推荐为参考方法,准确性最高

方法繁琐、特殊,不适用于临床常规检查


质量保证

1.操作规范化

避免操作误差, 如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。

2.注意干扰因素

①假性增高:

红细胞形态异常(如小红细胞、大红细胞、球形红细胞、椭圆形红细胞或镰形红细胞等)和红细胞增多时应注明,因红细胞的变形性减低和数量增多可使血浆残留量增加;
高网织红细胞或高白细胞等也可使HCT假性增高。

②假性降低:体外溶血、自身凝集等。

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