(1)染色原理:
1)染料的组成:
瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝溶解于甲醇而成。
不同的细胞由于所含化学成分不一样，对各种染料的亲和力也不一样：
①细胞中的碱性物质，如红细胞中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色，这些碱性物质又称为嗜酸性物质。
②细胞中的酸性物质，如淋巴细胞及嗜碱性粒细胞的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色，这些酸性物质又称为嗜碱性物质。
③中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染成淡紫红色，称为嗜中性物质。
2) pH的影响:
细胞多种成分属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定。
当pH小于pI (等电点)时，蛋白质带正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红;
当pH大于pI时，蛋白质带负电荷增多，易与美蓝或天青B结合，染色偏蓝。
因此，细胞染色对氢离子浓度十分敏感。染色时常用缓冲液(pH 6.4~6.8)来调节染色时的pH，以达到满意的染色效果。
(2)试剂:
1)瑞氏染液:瑞氏染料1.0g、甲醇600ml,甘油15ml。将全部染料放人清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢研磨，使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒人洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止，再加15ml甘油密封保存。甘油可防止甲醇过早挥发，同时也可使细胞着色清晰。
2)磷酸盐缓冲液(pH 6.8):磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.3g、 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.2g、蒸馏水加至1 000ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH,塞紧瓶口储存。也可以配成10倍浓缩的储存液，应用时稀释。
(3)染色:
1)标记血涂片:在已制备的血涂片的端用红蜡笔编号。
2)加瑞氏染液:待血涂片干透后，用蜡笔在两端画线，以防染色时染液外溢。然后将血涂片平放于染色架上，滴加染液3~5滴。
3)加缓冲液:约1min后，滴加等量或稍多的缓冲液，轻轻摇动血涂片或用洗耳球对准血涂片加液处轻吹，使染液充分混合。
4)冲洗染液:染色5~10min后，用流动的蒸馏水从血涂片一端冲去染液，约30s以上。染片背面用纱布擦净后，待干。
5)判断染色结果:在正常情况下，良好的染色结果为血膜外观为淡紫红色;低倍镜下，细胞分布均匀;红细胞呈粉红色(非红色或柠檬黄色)，少见染色颗粒。血细胞无人为形态如空泡。白细胞胞质能显示各类细胞的特有色彩，白细胞核染成紫红色，染色质 和副染色质清晰，粗细松紧可辨。
(1)染色原理:
与瑞氏染色法基本相同。吉姆萨染色法提高了噻嗪染料的质量，加强了天青的作用，本法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差。
(2) 试剂:吉姆萨染料1.0g、 甘油66ml、甲醇66ml。将1. 0g吉姆萨染料粉末全部倒入盛有66ml甘油的圆锥烧瓶内，在56°C的水浴锅上加热90~120min,使染料与甘油充分混匀溶解，然后加入60°C预热的甲醇，充分摇匀后放人棕色瓶，室温静止7天，过滤后使用。染液放置越久，细胞着色越佳。
(3)染色:
1)标记血涂片:在已制备的血涂片的一端用红蜡笔编号。
2)固定血膜:将干燥血涂片用甲醇固定3~5min。
3)血膜染色:将固定的血涂片置于被pH 6.4~6.8磷酸盐缓冲液稀释10~20倍的吉姆萨染液中，浸染10~30min，取出用流水冲洗，干燥。
方法学评价
瑞氏染色法是血细胞分析最常用的染色法，尤其对于细胞质成分及中性颗粒等的染色，可获得很好的染色效果，但对细胞核的染色不如吉姆萨染液。故采用瑞-吉姆萨复合染液可取长补短，使血细胞的胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。
质量保证
染色过深、 过浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH密切相关。
1.瑞氏染液质量
新配染色液的染色效果较差，放置时间越长亚甲蓝转变为天青越多，染色效果越好。染液应储存在棕色瓶中，久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
2.染色时间与染液浓度
染液淡、室温低、细胞多、有核细胞多，则染色时间要长;反之，则染色时间短。冲洗前可先在低倍镜下观察有核细胞是否染色清楚，核质是否分明。因此，染色时间应视具体情况而定，特别是更换新染料时必须经试染，选择最佳染色条件。
3.染色过程
血涂片应水平放置; 染液不能过少，以免蒸发后染料沉淀;加染液后可用吸耳球轻吹，让染液覆盖全部血膜;加缓冲液后要让缓冲液和染液充分混匀。
4.冲洗染液
水流不宜太快，应用流水将染液缓缓冲去，而不能先倒掉染液再用流水冲洗，以免染料沉着于血片上，干扰显微镜检查时对细胞的识别。冲洗时间不能过长，以免脱色。冲洗后的血涂片应立即立于玻片架上，防止血涂片被剩余的水分浸泡而脱色。若见血膜上有染料颗粒沉积，可用甲醇或瑞氏染液溶解，但需立即用水冲洗掉甲醇，以免脱色。
5.脱色与复染
(1)染色过深:可用甲醇或瑞氏染液适当脱色，也可用水冲洗或浸泡一定时间。
(2)染色过浅:可以复染，复染时应先加缓冲液，后加染液，或加染液与缓冲液的混合液，不可先加染液。