benshenmed(官方) 2020年03月03日
临床微生物 320
β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)
(1)原理:有的细菌可产生β半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚-β-D半乳糖苷(ONPG),而生成黄色的邻-硝基酚,在很低浓度下也可检出。
(2)方法:从克氏双糖铁培养基上取菌,于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液,加入一滴甲苯并充分振摇,使酶释放。将试管置37°C水浴5分钟,加人0. 25ml ONPG试剂,水浴20分钟-3小时观察结果。
(3)结果:菌悬液呈现黄色为阳性反应,一般在20~30分钟内显色。
(4)应用:迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性,而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定
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