检验速记

克氏双糖铁琼脂(KIA)-双糖试验的结果判读及应用

一、原理

KIA成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为 1：10， 指示剂为酚红，其在PH<6.8时变为黄色，而KIA的PH为7.4，产少量的酸就可导致颜色变化。斜面部分暴露于空气中，为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配KIA或TSI时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度，两者均为3cm ，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。 

用针穿刺时，取单个菌落，穿刺至底部3-5mm处，然后在斜面上往复划线。放35度培养18-24小时。

二、 双糖试验的结果判断及应用

双糖铁培养上层是固体培养基，含有乳糖；下层是半固体培养基，含有葡萄糖。（这个很关键）。双糖试验可以了解细菌是否分解乳糖，是否分解葡萄糖，是否产气，是否产H2S（培养基变黑色）,双糖试验因为是固体培养基，所以还能判断细菌是否有动力。

碱性（K），酸性（A）

主要用于革兰阴性杆菌的鉴别，主要是肠杆菌科细菌的鉴别。

常见细菌的双糖试验结果：

大肠埃希菌：A A  + -（发酵乳糖、葡萄糖，产气，不产H2S）

肺炎克雷伯菌：A A  + -（发酵乳糖、葡萄糖，产气，不产H2S）

伤寒沙门菌：K A - +(不发酵乳糖，发酵葡萄糖，不产气，产H2S)

志贺菌：K A - -（不发酵乳糖，发酵葡萄糖，不产气，不产H2s）

铜绿假单胞菌：K K（不发酵乳糖和葡萄糖）

三、糖公鸡笨笨的补充

笨笨，那个克氏双糖的我想说一句，双糖和克氏双糖不一样，双糖是上层下层分两次灌注，糖不一样，克氏双糖是1比10，一起灌注，上下糖分是一样的，而变色是因为如果细菌只分解葡萄糖，不分解乳糖，则斜面上产生少量的酸，且易被氧化产生氨呈弱碱性, 故斜面变为红色，底层变酸呈黄色，例如沙门菌。

如果细菌分解葡萄糖和乳糖，产生大量的酸，底层和斜面均呈黄色，例如大肠埃希菌。

如果细菌既不分解葡萄糖，也不分解乳糖则底层和斜面均不变色，例如铜绿假单胞菌